雙縮脲反應的原理是尿素加熱形成氨氣和雙縮脲，在呈堿性條件下，銅離子與雙縮脲結合形成紅紫色的絡(luò )合物，此反應成為雙縮脲反應。蛋白質(zhì)分子中含有肽鍵與雙縮脲結構相似，故能發(fā)生此反應。因所產(chǎn)生的顏色密度與參與反應肽鍵數成比例，可定性或定量分析蛋白質(zhì)濃度，在紫外可見(jiàn)光譜中的波長(cháng)為540nm。

Leagene雙縮脲試劑(AB液)由Biuret Reagent A、Biuret Reagent B組成，主要試劑為氫氧化鈉和硫酸銅。如果組織中含有蛋白質(zhì)或具有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應，顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，該試劑是較為粗略的驗證蛋白質(zhì)存在的方法，多用于定性檢測蛋白質(zhì)。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。