軟骨組織由軟骨細胞和軟骨基質(zhì)組成，軟骨組織及其周?chē)能浌悄嫵绍浌?，軟骨根據基質(zhì)內所含纖維素成分不同分為透明軟骨、彈性軟骨、纖維軟骨，軟骨染色方法有很多種，例如甲苯胺藍法、阿利新藍法、番紅O法等。

Leagene改良番紅O-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅O結合呈現紅色，嗜酸性的骨和酸性染料固綠結合而呈綠色或藍色，與呈現紅色的軟骨對比鮮明，從而將軟骨組織與骨組織區分開(kāi)。番紅O是一種結合多陰離子的陽(yáng)離子染料，其顯示軟骨是基于陽(yáng)離子染料與多糖中陰離子基團（硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素）結合，番紅O著(zhù)色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系，間接反映基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布；當軟骨受到損傷時(shí)軟骨中的糖蛋白會(huì )釋放出來(lái)，使基質(zhì)成分分布不均勻，從而導致番紅O淡染或不著(zhù)色，通過(guò)圖像分析軟件可對番紅O染色的軟骨基質(zhì)進(jìn)行定量分析，固綠與膠原纖維結合，不易褪色，番紅O-固綠染色的分化很關(guān)鍵，分化過(guò)度易導致切片不著(zhù)色，分化不足易導致切片著(zhù)色過(guò)深。該試劑僅適用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。