服務(wù)介紹：

       植物硝態(tài)氮檢測試劑盒(水楊酸比色法)檢測原理是在濃酸條件下，NO₃^-與水楊酸反應生成硝基水楊酸，后者在堿性條件下呈黃色，其顏色深淺與氮含量在一定范圍內呈正比，以分光光度計或酶標儀測定410nm處吸光度，根據NO₃^-的標準曲線(xiàn)即可計算出樣品的硝態(tài)氮含量，該試劑盒主要用于測定植物組織中的硝態(tài)氮含量。

實(shí)驗流程：

①植物樣品：取植物組織1g，清洗干凈，擦干，剪碎成1~2mm的碎片，加入10ml蒸餾水，沸水浴中提取30min，取出后用自來(lái)水冷卻至室溫，中速濾紙過(guò)濾，補蒸餾水至10ml，即為硝態(tài)氮提取液。

②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定，用于硝態(tài)氮的檢測。

③高活性樣品：如果樣品中含有較高濃度的硝態(tài)氮，可以使用硝態(tài)氮裂解液或蒸餾水等進(jìn)行恰當的稀釋后再行測定。

1、 配制水楊酸工作液：按水楊酸：濃硫酸=1g：20ml的比例，把水楊酸溶解于濃硫酸，4℃避光保存

2、 配制NO3- Assay Buffer(1×)：用蒸餾水將NO3- Assay Buffer(2×)稀釋一倍即可。

3、 配制系列NO3-標準溶液：取NO3-標準(200μg/ml)按下表加蒸餾水稀釋?zhuān)?/span>

        4、 NO3-加樣：按照下表設置空白管、標準管、測定管，溶液應按照順序依次加入

         5、NO3-測定：冷卻至室溫，以空白管調零，分光光度計(1cm光徑比色杯)或酶標儀測定標準管、測定管410nm處吸光度(記為A標準、A測定)。

實(shí)驗結果：

全自動(dòng)生化儀檢測后導出結果，結果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求：

1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱(chēng)取動(dòng)物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉/分鐘，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測定。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜（GLU檢測請勿全血樣本放置過(guò)夜取血清）后于2-8℃ 3000轉/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心，然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運輸)

可用肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2-8℃3000轉/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心，然后檢測。

4、細胞樣本

貼壁細胞：將細胞用PBS沖洗2次后，用細胞刮將細胞小心刮下來(lái)，將培養液3000轉/分，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。

懸浮細胞：將培養液3000轉/分，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。

細胞上清：標本于2-8℃，3000轉/分離心15min取上清，上清立即用于實(shí)驗，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！