服務(wù)介紹：

        肉桂醇脫氫酶(CAD)檢測試劑盒(肉桂酸比色法)檢測原理是以肉桂酸、NADP作為底物，在酶促反應的最適條件下采用每隔一定時(shí)間測定產(chǎn)物生成量的方法，于分光光度計340nm處檢測吸光度，以吸光度變化所需酶量進(jìn)行計算，主要用于植物組織的裂解液或勻漿液、血清等樣品中內源性的肉桂醇脫氫酶活性，尤其適用于檢測水果中肉桂醇脫氫酶活性，25T可以檢測23~24個(gè)樣品

實(shí)驗流程：

1.、準備樣品：

①植物樣品：取1g植物組織或水果中層果肉置于液氮中迅速研磨或勻漿，加1～1.2ml預冷的CAD Lysis Buffer，4℃ 10000r/min離心15~20min，留取上清液

②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定，-20℃凍存，用于肉桂醇脫氫酶的檢測。

③細胞或組織樣品：取恰當細胞或組織裂解液，如有必要用CAD Lysis Buffer進(jìn)行適當勻漿，4℃ 10000r/min離心15~20min，取上清液

④高活性樣品：如果樣品中含有較高活性的肉桂醇脫氫酶，可以使用CAD Lysis Buffer稀釋進(jìn)行恰當的稀釋。

2、配制CAD Assay Buffer工作液：取1支NADP完全溶解于10ml CAD Assay Buffer，即為CAD Assay Buffer工作液

3、CAD加樣：按照下表設置對照管、測定管，溶液應按照順序依次加入

 4、CAD檢測：以對照管為對照(調零)，比色杯光徑1.0cm，分光光度計立即測定340nm處測定管的吸光度(記為A_測定0)，37℃準確孵育10min，立即加入0.05ml CAD終止液終止反應(備選方案)，以對照管為對照(調零)，分光光度計立即測定340nm處測定管的吸光度(記為A_測定1)。

實(shí)驗結果：

全自動(dòng)生化儀檢測后導出結果，結果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求：

1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱(chēng)取動(dòng)物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉/分鐘，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測定。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜（GLU檢測請勿全血樣本放置過(guò)夜取血清）后于2-8℃ 3000轉/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心，然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運輸)

可用肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2-8℃3000轉/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心，然后檢測。

4、細胞樣本

貼壁細胞：將細胞用PBS沖洗2次后，用細胞刮將細胞小心刮下來(lái)，將培養液3000轉/分，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。

懸浮細胞：將培養液3000轉/分，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。

細胞上清：標本于2-8℃，3000轉/分離心15min取上清，上清立即用于實(shí)驗，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！