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測定植物根系活力時(shí),以TTC為底物,保溫1~4小時(shí),根系中脫氫酶能夠還原TTC并生成不溶于水的紅色TTF,再用有機溶劑(乙酸乙酯或丙酮等)將其從根中提取出來(lái),用分光光度計或酶標儀檢測485nm處吸光度,進(jìn)而計算出TTC的還原量,以該還原量表示脫氫酶活性,并作為植物根系活力的指標,該試劑盒主要用于定量測定植物的根系活力或脫氫酶活性。
價(jià)格:¥15.00
規格:反應
貨號:ST1515
品牌:LEAGENE
服務(wù)介紹:
測定植物根系活力時(shí),以TTC為底物,保溫1~4小時(shí),根系中脫氫酶能夠還原TTC并生成不溶于水的紅色TTF,再用有機溶劑(乙酸乙酯或丙酮等)將其從根中提取出來(lái),用分光光度計或酶標儀檢測485nm處吸光度,進(jìn)而計算出TTC的還原量,以該還原量表示脫氫酶活性,并作為植物根系活力的指標,該試劑盒主要用于定量測定植物的根系活力或脫氫酶活性。
貨號 | 名稱(chēng) | 規格 | 價(jià)格 |
ST1515 | 植物根系活力檢測試劑盒 | 反應 | 15元 |
實(shí)驗結果展示:
實(shí)驗流程:
1. 檢測準備工作:
1.1. TTF系列標準管配制:根據需要,進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)ɡ缦♂屩?5、50、100、150、200、400μg),與待測樣品進(jìn)行后續檢測后,用于標準曲線(xiàn)法數據分析;
1.2.準備樣品:取0.2~0.5g植物須根系,洗凈,用濾紙吸干,完全浸沒(méi)于TTC Assay buffer工作液中,37℃避光孵育1~3h,加入2ml TTC終止液終止反應;同時(shí)做一空白對照實(shí)驗,即根系先完全浸沒(méi)于2ml TTC終止液以殺死根樣,再加入10ml TTC Assay Buffer工作液,37℃避光孵育1~3h。取出充分研磨或勻漿,以提取出TTF,把紅色提取液(TTF)轉移至離心管,并用少量乙酸乙酯把殘渣洗滌2~3次,再將洗滌液一并轉移至離心管,最后補加乙酸乙酯至10ml,搖勻。
1.3測定:比色杯光徑1.0cm,系列標準管以“0”號管調零,測定1~5號管485nm的吸光度值;樣品管以空白對照組樣品提取液做參比,調零,以分光光度計或酶標儀測定實(shí)驗組樣品提取液在485nm的吸光度值。
實(shí)驗結果:全自動(dòng)生化儀檢測后導出結果,結果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣運輸要求:
1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運輸)
準確稱(chēng)取動(dòng)物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉/分鐘,離心10分鐘,取上清液進(jìn)行測定。
2、血清樣本(干冰運輸)
全血標本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜(GLU檢測請勿全血樣本放置過(guò)夜取血清)后于2-8℃ 3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。
3、血漿樣本(干冰運輸)
可用肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8℃3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。
4、細胞樣本
貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來(lái),將培養液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
懸浮細胞:將培養液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
細胞上清:標本于2-8℃,3000轉/分離心15min取上清,上清立即用于實(shí)驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。
僅供科研用途,不可用于臨床診斷!