服務(wù)介紹：

    植物總糖和還原糖檢測試劑盒(DNS比色法)檢測原理是還原糖在堿性加熱條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系，在540nm處用分光光度計測定棕紅色物質(zhì)的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線(xiàn)性關(guān)系，利用標準曲線(xiàn)計算樣品中的還原糖和總糖的含量。 

實(shí)驗流程：

還原糖的提?。?/span>

①稱(chēng)取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉移至該容器。

②50℃水浴30min，并不時(shí)攪拌，以便還原糖徹底浸出。

③將沉淀和浸出液轉移至50ml離心管，4000g離心5min。

④留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸餾水，混勻，再次4000g離心5min。

⑤留取上清液，將2次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100ml(提取液)，混勻，作為還原糖待測液。

總糖的水解和提?。?/span>

①稱(chēng)取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉移至該容器。

②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸30min，并不時(shí)攪拌。

③取2滴滴加于載玻片上，滴加1滴顯色液(約50ul)，檢查水解是否完全，如已經(jīng)水解完全，則不顯示藍色。

④水解完畢后，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4，用蒸餾水定容至100ml，混勻，4000g離心5min。

⑤取上清或濾液10ml，用蒸餾水定容至100ml，成稀釋10倍的總糖水解液(提取液)，取0.5ml總糖水解液，測定其還原糖的含量。

稀釋葡萄糖標準：取干凈離心管，按下表操作，依次獲得系列濃度的Glu標準。

加樣：取5ml離心管，按照下表設置空白管、標準管、測定管，溶液應按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡，小心混勻；如果樣品中的糖濃度過(guò)高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進(jìn)行測定，樣品的檢測最好能設置2~3平行管，求平均值。

 還原糖測定：混勻，以空白管調零，比色杯光徑1cm，分光光度計測定540nm處標準管、測定管的吸光度。

 實(shí)驗結果：全自動(dòng)生化儀檢測后導出結果，結果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求：

植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱(chēng)取動(dòng)物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉/分鐘，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測定。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！