甘油三酯被脂蛋白酯酶(LPL)水解為甘油和脂肪酸,甘油經(jīng)甘油激酶(GK)和三磷酸腺苷(ATP)磷酸化為3-磷酸甘油(G-3-P),后被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并產(chǎn)生過(guò)氧化氫,再經(jīng)過(guò)氧化物酶(POD)、4-氨基安替比林(4-AAP)與酚(三者合稱(chēng)PAP)反應,生成紅色苯醌亞胺(Trinder反應),苯醌亞胺的最大吸收在510nm波長(cháng)處,吸光度與樣本中甘油三酯含量呈正比,可通過(guò)酶標儀在500~520nm處進(jìn)行比色測定。本試劑盒用于人或動(dòng)物的血清、細胞、組織等樣本中的甘油三酯含量定量測定。
價(jià)格:¥10.00
規格:反應
貨號:ST1255
品牌:LEAGENE
服務(wù)介紹:
甘油三酯被脂蛋白酯酶(LPL)水解為甘油和脂肪酸,甘油經(jīng)甘油激酶(GK)和三磷酸腺苷(ATP)磷酸化為3-磷酸甘油(G-3-P),后被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并產(chǎn)生過(guò)氧化氫,再經(jīng)過(guò)氧化物酶(POD)、4-氨基安替比林(4-AAP)與酚(三者合稱(chēng)PAP)反應,生成紅色苯醌亞胺(Trinder反應),苯醌亞胺的最大吸收在510nm波長(cháng)處,吸光度與樣本中甘油三酯含量呈正比,可通過(guò)酶標儀在500~520nm處進(jìn)行比色測定。本試劑盒用于人或動(dòng)物的血清、細胞、組織等樣本中的甘油三酯含量定量測定。
貨號 | 名稱(chēng) | 規格 | 價(jià)格 |
ST1255 | 甘油三酯 | 反應 | 10 |
實(shí)驗結果展示:
實(shí)驗流程:
試劑盒:
1、樣本接收:血清、血漿、細胞、組織、腦脊液
2、實(shí)驗步驟:
(1)工作試劑的配制: 配制GPO-PAP工作液:將緩沖液和酶試劑按4:1體積比混合均勻即成。
(2)半自動(dòng)生化分析儀TG測定操作
計算公式:
血清、血漿等液體樣本(空白調零):
TG(mmol/L)=(待測管吸光度/標準管吸光度)×1.7mmol/L
細胞、組織等樣本(空白調零):
TG(mmol/g)=(待測管吸光度/標準管吸光度)×1.7mmol/L÷待測樣本蛋白濃度(mg/ml)
實(shí)驗結果:全自動(dòng)生化儀檢測后導出結果,結果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣運輸要求:
以下所有樣本必須盡量新鮮!
1.動(dòng)植物組織樣本(干冰運輸)
準確稱(chēng)取動(dòng)物組織重量,按重量(mg): 體積(L)=1:9 的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦 0.86% 或 0.9% 的生理水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500-3000r/min,離心10分鐘,取上清液進(jìn)行測定。
2.血清樣本(干冰運輸)
全血標本請于室溫放置2h或4℃過(guò)夜后于 2-8℃3000r/min離心15min,取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝,并將標本放于 -20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。
3.血漿樣本(干冰運輸)
可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30min內于2-8℃3000r/min離心15min,取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。
4.細胞樣本
貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來(lái),接著(zhù)將培養液3000r/min離心 10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
懸浮細胞:將培養液3000r/min離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
細胞上清:標本于2-8℃3000r/min離心15min取上清,上清立即用于實(shí)驗,或分裝后于-20或-80保存。避免反復凍融。
5.全血樣本(4℃運輸)
EDTA抗凝管取適量抗凝全血時(shí),EDTA與血液最佳比例為1.5mg:1mL,樣本量不可太多或太少,取樣后上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻。4℃運輸,不可與冰袋直接接觸,不可猛烈撞擊??鼓獌H用于血常規檢測,不可運輸后再離心取血漿。
僅供科研用途,不可用于臨床診斷!